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dc.contributor.advisorFlores Hernández, Ignacio
dc.contributor.authorMonreal Peinado, Sara
dc.date.accessioned2021-08-30T12:07:42Z
dc.date.available2021-08-30T12:07:42Z
dc.date.issued2021
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10641/2411
dc.description.abstractLos telómeros son estructuras que protegen el material genético de la pérdida de ADN codificante y de otros procesos de reparación. Cuando una célula se divide pierde parte de la estructura telomérica pudiendo llegar a un punto en el que el proceso de división queda interrumpido al quedar el ADN desprotegido. Por tanto, para hacer a una célula inmortal esta necesita activar mecanismos de mantenimiento de los telómeros (TMM). Existen diferentes TMM, la activación de la telomerasa (TA) y el alargamiento alternativo de los telómeros (ALT). Una característica de las células ALT+ (positivas para el mecanismo ALT) son las roturas generadas en los extremos teloméricos produciéndose ECTRs (Repeticiones teloméricas extracromosómicas). En este trabajo hemos analizado si las ECTRs se fusionan entre sí por mecanismos asociados a procesos de homología o de NHEJ (Non-Homologous End Joining ). Además, hemos estudiado la localización de las ECTRs para su posterior caracterización mediante NGS (Next Generation Sequencing ). Previamente nos cercioramos, mediante la técnica TRAP (Telomeric Repeat Amplification Protocol ), que las células ALT+ usadas en este estudio no presentan actividad telomerasa. También comprobamos que estas células presentan una mayor heterogeneidad e intensidad de fluorescencia (longitud telomérica) y una mayor presencia de PML-NBs (Cuerpos nucleares de Leucemia Promielocítica) al compararlas con las células con TA. Por último, localizamos fusiones entre ECTRs usando la técnica SABER-FISH (Signal Amplification By Exchange Reaction and Fluorescent In Situ Hybridization ). La detección de fusiones mostró mayor presencia de ambos tipos de fusiones en células ALT+, estando en mayor proporción las asociadas a homología. En cuanto al aislamiento de estas fusiones, para su posterior caracterización, se obtuvieron niveles muy bajos. En conclusión, las células tumorales ALT+ presentan las características propias de este tipo de TMM, es decir, mayor longitud y heterogeneidad telomérica, ausencia de actividad telomerasa y mayor cantidad de PML-NBs. También se ha visto como las fusiones asociadas a este mecanismo son mayoritarias en células ALT+, lo que concuerda con lo esperado. Por otro lado, el rendimiento adquirido en la extracción del ADN no fue el esperado y por eso se requiere amplificar ese material genético para su posterior secuenciación y caracterización.spa
dc.language.isospaspa
dc.rightsAtribución-NoComercial-SinDerivadas 3.0 España*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/es/*
dc.titleLocalización y caracterización de fusiones de ADN procedentes del mecanismo de Alargamiento Alternativo de Telómeros (ALT).spa
dc.typebachelorThesisspa
dc.description.versionpre-printspa
dc.rights.accessRightsopenAccessspa
dc.description.extent10639 KBspa


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