Álvarez Vallina, LuisSantos Tejedor, CruzRubio-Pérez, LauraDoctorado en Biotecnología, Medicina y Ciencias Biosanitarias.2024-11-182024-11-182024https://hdl.handle.net/10641/5406Nota: fecha de lectura 12/11/2024La tecnología de anticuerpos recombinantes ha experimentado un considerable avance en los últimos años, con un número creciente de moléculas en desarrollo clínico, debido a la necesidad de desarrollar tratamientos más efectivos y específicos para diferentes patologías, como el cáncer y las infecciones virales. Aunque existen varias plataformas tecnológicas para la generación de anticuerpos multiespecíficos, aún persisten limitaciones relacionadas con la estabilidad, inmunogenicidad y farmacocinética de las moléculas generadas. En este trabajo hemos desarrollado un anticuerpo biespecífico PD-L1/EGFR mediante la fusión de un tandem trimerbody con las regiones bisagra y Fc de la IgG1 humana. Este anticuerpo, denominado IgTT-1E, se caracterizó estructural y funcionalmente, demostrando capacidad de reconocer simultáneamente los antígenos EGFR y PD-L1, inhibir la proliferación mediada por EGF, bloquear la interacción PD-1/ PD-L1 e inducir actividad de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos específica de antígeno y desgranulación de las células NK. También demostró una potente actividad anti-tumoral en modelos de ratón humanizados portadores de xenoinjertos de cáncer de mama triple negativo y de cáncer de pulmón, en los que el control del crecimiento tumoral se asoció con un aumento significativo del número de células T CD8+. Estos resultados apoyan el desarrollo clínico del anticuerpo IgTT-1E para el tratamiento de tumores EGFR+.Recombinant antibody technology has made significant progress in recent years, with an increasing number of molecules in clinical development, driven by the need to develop more effective and specific treatments for a range of diseases such as cancer and viral infections. Although there are several technological platforms for the generation of multispecific antibodies, there are still limitations in terms of stability, immunogenicity and pharmacokinetics of the generated candidates. In this work, we have developed a PD-L1/EGFR bispecific antibody by fusing a tandem trimerbody with the hinge and Fc regions of human IgG1. This antibody, termed IgTT-1E, was structurally and functionally characterized and demonstrated the ability to simultaneously recognize EGFR and PD-L1 antigens, inhibit EGF-mediated proliferation, block PD-1/PD-L1 interaction and induce antigen-specific antibody-dependent cellular cytotoxicity activity and NK cell degranulation. It also demonstrated potent anti-tumor activity in humanized xenograft mouse models of triple negative breast cancer and lung cancer, where tumor growth control was associated with a significant increase in CD8+ T cell numbers. These results support the clinical development of the IgTT-1E antibody for the treatment of EGFR+ cancers.spaAttribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internationalhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/doctoral thesisopen access