Vargas-Foitzick, RonaldIrribarra-Tapia, DiegoValero-Breton, MayalenBalboa, Elisa2026-09-302026-09-302026-06-30Vargas-Foitzick, R, Irribarra-Tapia, D, Valero-Breton, M & Balboa, E 2026, 'Urolithin A enhances mitochondrial biogenesis-related markers and maximal respiratory capacity during C2C12 differentiation', Frontiers in Cell and Developmental Biology, vol. 14, 1854844. https://doi.org/10.3389/fcell.2026.18548442296-634XPubMedCentral: PMC13364912https://hdl.handle.net/10641/8414Publisher Copyright: Copyright © 2026 Vargas-Foitzick, Irribarra-Tapia, Valero-Breton and Balboa.Introducción – La diferenciación del músculo esquelético en el modelo de mioblastos C2C12 requiere una remodelación mitocondrial extensa para satisfacer las crecientes demandas bioenergéticas mediante cambios coordinados en la biogénesis, la dinámica y la adaptación respiratoria. La urolitina A (UA), un metabolito de las elagitaninos derivado de la microbiota intestinal, mejora la salud mitocondrial, pero su papel en la diferenciación miogénica tardía sigue sin estar claro. Métodos – Los miotubos C2C12 se trataron con UA (2 μM) durante 72 h durante la diferenciación en fase tardía (días 3-6). La señalización mitocondrial, la capacidad respiratoria, la morfología miogénica y la ultraestructura se evaluaron mediante Western blot, respirometría de alta resolución, tinción de hematoxilina-eosina y microscopía electrónica de transmisión. Resultados – La UA no fue citotóxica y aumentó la fosforilación de AMPKα y la expresión de PGC-1α, mientras que TOM20, MFN2 y OPA1 no se modificaron. Los marcadores relacionados con la mitofagia/autofagia (p-ULK1, p62, BNIP3L/NIX, LC3-II/I) no se vieron alterados, lo que indica que no hubo cambios detectables en la autofagia en estado estacionario en las condiciones evaluadas. La UA aumentó selectivamente la abundancia de los Complejos I y II de la OXPHOS y potenció la respiración máxima desacoplada, y se asoció con un aumento del diámetro de los miotubos y de la abundancia de marcadores miogénicos. No se observaron diferencias ultraestructurales manifiestas mediante microscopía electrónica. Discusión – Estos hallazgos sugieren que la UA promueve la adaptación funcional mitocondrial durante la diferenciación miogénica, con cambios concomitantes en el fenotipo miogénico, sin evidencia clara de alteración de los marcadores de mitofagia/autofagia en estado estacionario ni de la morfología mitocondrial. [Traducción automática al español; idioma original: inglés.]Introduction – Skeletal muscle differentiation in the C2C12 myoblast model requires extensive mitochondrial remodeling to meet rising bioenergetic demands through coordinated changes in biogenesis, dynamics, and respiratory adaptation. Urolithin A (UA), a gut microbiota-derived metabolite of ellagitannins, improves mitochondrial health, but its role in late-stage myogenic differentiation remains unclear. Methods – C2C12 myotubes were treated with UA (2 μM) for 72 h during late-stage differentiation (days 3–6). Mitochondrial signaling, respiratory capacity, myogenic morphology, and ultrastructure were assessed by Western blot, high-resolution respirometry, hematoxylin–eosin staining, and transmission electron microscopy. Results – UA was non-cytotoxic and increased AMPKα phosphorylation and PGC-1α expression, whereas TOM20, MFN2, and OPA1 were unchanged. Mitophagy/autophagy-related markers (p-ULK1, p62, BNIP3L/NIX, LC3-II/I) were not altered, indicating no detectable changes in steady-state autophagy under the conditions tested. UA selectively increased OXPHOS Complex I and II abundance and enhanced maximal uncoupled respiration, and was associated with increased myotube diameter and myogenic marker abundance. No overt ultrastructural differences were observed by electron microscopy. Discussion – These findings suggest that UA promotes mitochondrial functional adaptation during myogenic differentiation, with accompanying changes in myogenic phenotype, without clear evidence of altered steady-state mitophagy/autophagy markers or mitochondrial morphology.113720341enghttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/C2C12 myotubesmaximal respirationmyogenic differentiationoxphosurolithin ADevelopmental BiologyCell BiologyYesjournal articleopen access10.3389/fcell.2026.1854844https://www.scopus.com/pages/publications/105048823134https://www.scopus.com/pages/publications/105048823134#tab=citedBy