the Cohorts for Heart and Aging in Genomic Epidemiology Hemostasis Working Group2026-09-302026-09-302026-03the Cohorts for Heart and Aging in Genomic Epidemiology Hemostasis Working Group 2026, 'RAB5C Increases Endothelial Release of VWF by Regulating Vesicle Trafficking', Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology, vol. 46, no. 3, e323000, pp. e323000. https://doi.org/10.1161/ATVBAHA.125.3230001079-5642PubMedCentral: PMC12823045unpaywall: 10.1161/atvbaha.125.323000https://hdl.handle.net/10641/8425Publisher Copyright: © 2026 American Heart Association, Inc.ANTECEDENTES: – Los niveles anómalos de VWF (factor de von Willebrand) son un factor de riesgo para el tromboembolismo venoso (TEV) y la hemorragia. Los estudios de asociación del genoma completo para el VWF han identificado nuevos genes candidatos que podrían regular los niveles de VWF en humanos, incluido RAB5C (proteína RAB5C asociada a RAS [rat sarcoma]). Planteamos la hipótesis de que RAB5C regula la liberación de VWF desde las células endoteliales. MÉTODOS: – Estudiamos el efecto de RAB5C sobre el tráfico vesicular en células endoteliales humanas. Realizamos interferencia CRISPR (repeticiones palindrómicas cortas agrupadas y regularmente interespaciadas) dirigida a 2 variantes genéticas vinculadas a niveles alterados de VWF y evaluamos la expresión de RAB5C mediante retrotranscripción-PCR cuantitativa. Silenciamos RAB5C o sobreexpresamos RAB5C de tipo silvestre, constitutivamente activo o dominante negativo; y a continuación medimos la exocitosis de VWF desde células endoteliales de vena umbilical humana hacia el medio mediante ELISA. Realizamos marcaje por proximidad y espectrometría de masas para identificar las vías de señalización intracelular que median los efectos de RAB5C sobre la exocitosis de VWF. RESULTADOS: – Encontramos que 2 variantes genéticas (rs9915255 y rs9912088, identificadas por estudios de asociación del genoma completo para niveles de VWF) regulan la expresión de RAB5C en células endoteliales derivadas de células madre. A continuación silenciamos o sobreexpresamos RAB5C en células endoteliales para evaluar su efecto sobre la liberación de VWF. El silenciamiento de RAB5C disminuyó la liberación de VWF tras la estimulación con histamina, mientras que la sobreexpresión de RAB5C o de RAB5C constitutivamente activo aumentó la liberación endotelial de VWF. Para explorar la vía de señalización intracelular que media los efectos de RAB5C sobre la exocitosis de VWF, realizamos marcaje por proximidad y espectrometría de masas. Identificamos 147 proteínas próximas a RAB5C, muchas de las cuales están implicadas en el tráfico vesicular. A partir de este cribado, identificamos SNAP29 (proteína asociada a sinaptosoma 29), una proteína asociada a SNARE (receptor de unión a NSF [factor sensible a N-etilmaleimida] soluble) que desempeña un papel crucial en la fusión vesicular, como un interactor clave de RAB5C que regula la exocitosis de VWF. CONCLUSIONES: – En conjunto, nuestros datos demuestran que RAB5C regula la liberación de VWF en parte mediante el control de SNAP29 sobre el tráfico vesicular en células endoteliales. Estos hallazgos validan los datos de epidemiología genética que vinculan RAB5C con los niveles de VWF en humanos y aportan nuevos conocimientos sobre los mecanismos moleculares que regulan la exocitosis de VWF. [Traducción automática al español; idioma original: inglés.]BACKGROUND: – Abnormal levels of VWF (von Willebrand Factor) are a risk factor for venous thromboembolism (VTE) and bleeding. Genome-wide association studies for VWF have identified novel candidate genes that may regulate VWF levels in humans, including RAB5C (RAS [rat sarcoma]-associated protein RAB5C). We hypothesized that RAB5C regulates VWF release from endothelial cells. METHODS: – We studied the effect of RAB5C on vesicle trafficking in human endothelial cells. We performed CRISPR (clustered regularly interspaced short palindromic repeats) interference targeting 2 genetic variants linked to altered VWF levels and evaluated RAB5C expression by reverse transcription–quantitative polymerase chain reaction. We silenced RAB5C or overexpressed RAB5C wild-type, constitutive active or dominant negative; and then, we measured VWF exocytosis from human umbilical vein endothelial cells to the media by ELISA. We performed proximity labeling and mass spectrometry to identify intracellular signaling pathways mediating the effects of RAB5C on VWF exocytosis. RESULTS: – We found that 2 genetic variants (rs9915255 and rs9912088 identified by genome-wide association studies for VWF levels) regulate RAB5C expression in stem cell–derived endothelial cells. We next silenced or overexpressed RAB5C in endothelial cells to assess its effect on VWF release. RAB5C silencing decreased VWF release after histamine stimulation, whereas overexpression of RAB5C or constitutively active RAB5C increased endothelial VWF release. To explore the intracellular signaling pathway mediating the effects of RAB5C on VWF exocytosis, we performed proximity labeling and mass spectrometry. We identified 147 proteins proximal to RAB5C, many of which are involved in vesicle trafficking. From this screen, we identified SNAP29 (synaptosome-associated protein 29), a SNARE (soluble NSF [N-ethylmaleimide-sensitive factor] attachment receptor)-associated protein that plays a crucial role in vesicle fusion, as a key RAB5C interactor regulating VWF exocytosis. CONCLUSIONS: – Taken together, our data demonstrate that RAB5C regulates VWF release in part through SNAP29 control of vesicle trafficking in endothelial cells. These findings validate genetic epidemiology data linking RAB5C to VWF levels in humans and provide new insights into the molecular mechanisms regulating VWF exocytosis.167590122enghttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/endothelial cellsgenome-wide association studythrombosisvenous thromboembolismvon Willebrand FactorCardiology and Cardiovascular MedicineJournal ArticleYesjournal articleopen access10.1161/ATVBAHA.125.323000https://www.scopus.com/pages/publications/105031391415https://www.scopus.com/pages/publications/105031391415#tab=citedBy