Diagnostic potential of GLP recombinant antigens in whole blood assays for Leishmania infantum infection

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Abstract

Antecedentes: El ensayo de estimulación en sangre total (WBA) es una herramienta valiosa para detectar la infección asintomática por Leishmania y monitorizar el tratamiento de la leishmaniasis visceral (LV). Este estudio buscó identificar proteínas recombinantes específicas para sustituir al antígeno soluble de Leishmania inespecífico en este ensayo, lo que podría resultar útil para desarrollar una prueba diagnóstica estandarizada que cumpla con las buenas prácticas de fabricación. Métodos: Empleando un ensayo de linfoproliferación celular, evaluamos aquí el comportamiento de 11 antígenos recombinantes en 61 sujetos que habían sido tratados con éxito o se habían recuperado espontáneamente de una infección por Leishmania infantum. A continuación, seleccionamos aquellos antígenos que mostraban diferencias significativas en los índices de estimulación de células inmunitarias y en la secreción de citocinas entre un grupo respondedor y otro no respondedor, respectivamente, en función de si presentaban o no una respuesta celular frente a L. infantum. Los tres mejores antígenos candidatos, ΔCpB, NSC y ENSC, se emplearon después en un WBA realizado en sangre periférica de 53 sujetos estratificados según el estado de leishmaniasis [LV curada, leishmaniasis cutánea (LC) curada, leishmaniasis asintomática (AS) y controles sanos]. Resultados: Se comprobó que ENSC era el antígeno más eficaz para detectar la LV curada mediante la medición de la producción específica de IP-10 (90% de reconocimiento), y que el TNF inducido por ΔCpB era el más eficaz para detectar la LC curada (71,4% de reconocimiento). Aunque las citocinas IL-2 e IP-10 inducidas por NSC y ENSC fueron capaces de detectar la AS, esta capacidad fue solo moderada (60%). Conclusiones: Proponemos que, una vez validados en estudios de mayor tamaño, estos antígenos de Leishmania GLP podrían contribuir a mejorar la precisión del seguimiento del tratamiento y del diagnóstico de curación. [Traducción automática al español; idioma original: inglés.]