A Refined Approach to Isolate Interneurons for High-Validity Epigenetic Studies in Human Brain Tissue
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La investigación epigenética ha experimentado notables avances en los últimos años; sin embargo, nuestra capacidad para explorar el cerebro humano a nivel celular sigue siendo limitada. Uno de los principales obstáculos ha sido la dificultad de aislar poblaciones neuronales específicas a partir de tejido postmortem, en particular las interneuronas, que desempeñan un papel central en numerosos trastornos psiquiátricos. En este estudio presentamos un protocolo práctico y reproducible para aislar interneuronas GAD-positivas a partir de muestras de cerebro humano. Aislamos estructuras similares a células permeabilizadas adecuadas para el análisis epigenético posterior. Para garantizar la especificidad, validamos las células aisladas comparándolas con interneuronas derivadas de iPSC humanas. Este enfoque permite obtener ADN de alta calidad apto para el análisis epigenético posterior, incluida la PCR específica de metilación. Al dirigirse a un subtipo neuronal bien definido, nuestro método proporciona una base sólida para estudiar los cambios moleculares asociados a trastornos como la esquizofrenia y el autismo. Este protocolo abre nuevas vías para investigaciones específicas de tipo celular en tejido cerebral, un avance en la comprensión de cómo los mecanismos epigenéticos contribuyen a la fisiopatología neuropsiquiátrica. [Traducción automática al español; idioma original: inglés.]